doi: 10.56294/hl2024.547

 

ORIGINAL

 

Tooth whitening and adherence of C.Albicans

 

Blanqueamiento dental y adherencia de C.Albicans

 

Marina Laura Kees1, María Isabel Brusca1 , María Laura Garzon1 , Atilio Vela Ferreira1, Virginia Jewtuchowicz2,3

 

1Universidad Abierta Interamericana, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Carrera de Odontologia. Buenos Aires, Argentina.

2Universidad de Buenos Aires, Facultad de Medicina, Departamento de Microbiología. Buenos Aires, Argentina.

3Universidad Abierta Interamericana, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Especialidad Periodoncia. Buenos Aires, Argentina.

 

Citar como: Kees ML, Brusca MI, Garzon ML, Vela Ferreira A, Jewtuchowicz V. Tooth whitening and adherence of C.Albicans. Health Leadership and Quality of Life. 2024; 3:.547. https://doi.org/10.56294/hl2024.547

 

Enviado: 19-04-2024                   Revisado: 05-09-2024                      Aceptado: 24-11-2024              Publicado: 25-11-2024

 

Editor: PhD. Prof. Neela Satheesh

 

ABSTRACT

 

Introduction: tooth whitening is nowadays one of the most requested aesthetic procedures by patients. Hydrogen peroxide contains unstable peroxides that produce oxygen free radicals, capable of breaking down the pigmented organic carbon components contained in the enamel matrix, converting them into shorter chain molecules and less pigmented, defined as oxidation, which continues for some time, and can decompose the organic materials into carbon dioxide and water, which would represent the loss of the enamel matrix.

One of the effects is the alteration of surface roughness and deeper cracks, as well as an increase in surface porosity, which could increase the adhesion of microorganisms.

Objective: to determine if the adhesion of Candida albicans is greater in enamel subjected to bleaching with 35 % hydrogen peroxide.

Method: the sample consisted of 20 healthy premolars extracted with orthodontic indication from patients between 13 and 35 years old with a post extraction time of less than 6 months.

Two groups were randomly assigned, control group (no bleaching only sterile water) and experimental group (professional bleaching with 35 % hydrogen peroxide). The teeth were sterilized and then incubated with Candida albicans for 36 hours. Then a sample of the vestibular side of the teeth was taken with sterile microbruhs to be centrifuged, and the seeding was performed in plates with sabouraud glucose agar from the supernatant of the centrifugation with a volume of 7 microliters, streaked with ansa. The CFU of both groups were quantified after 36 h of incubation in an oven at 37ºC.

Results: the data were processed in Excel through the real statistics add-in system, the Shapiro Wilk test was applied to determine the normal distribution of the data, the F test for variances of two samples which resulted in equal variances; therefore, the parametric T-student test for independent samples for equal variances was selected. The result for one-tailed analysis was P value of 0,04 so we can think that this difference between control and experimental group exists, and in which case there was greater adherence of Candida in the control group compared to the experimental group.

Conclusions: the literature is controversial; we can assume that the greater adherence of Candida albicans in the control group was due to the antimicrobial action of the bleaching agent on the experimental group.

 

Keywords: Hydrogen Peroxide; External Tooth Whitening; Candida Albicans; Candida Adherence.

 

RESUMEN

 

Introducción: el blanqueamiento dental es por hoy uno de los procedimientos estéticos más requeridos por los pacientes. El Peróxido de Hidrogeno contiene peróxidos inestables que producen radicales libres de oxígeno, capaces de romper los componentes orgánicos de carbono pigmentados contenidos en la matriz del esmalte, convirtiéndolos en moléculas de cadena más cortas y menos pigmentadas definiéndose como oxidación, la misma continúa por algún tiempo, pudiendo llegar a descomponer los materiales orgánicos en dióxido de carbono y agua, lo que representaría la pérdida de la matriz del esmalte. Uno de los efectos es la alteración de la rugosidad de la superficie y grietas más profundas, así como aumento de la porosidad de la superficie por lo que podría este efecto aumentar la adhesión de microorganismo.

Objetivo: determinar si la adherencia de Candida albicans es mayor en esmalte sometido a blanqueamiento con peróxido de hidrogeno al 35 %.

Método: la muestra estuvo conformada por 20 premolares sanos extraídos con indicación ortodoncia de pacientes entre 13 y 35 años con un tiempo post extracción inferior de 6 meses. Se designó aleatoriamente dos grupos, grupo control (sin blanqueamiento solo agua estéril) y grupo experimental (blanqueamiento profesional con peróxido de hidrogeno 35 %). Los dientes fueron esterilizados para posteriormente ser incubados con Candida albicans por 36 hs. Luego se tomó muestra de la cara vestibular de dichas piezas con microbruhs estéril para centrifugarlas, se realizó la siembra en placas con agar sabouraud glucosado a partir del sobrenadante del centrifugado con un volumen de 7 microlitros, estriado con ansa. Se cuantificaron las UFC de ambos grupos tras 36 hs de incubación en estufa a 37ºC.

Resultados: los datos fueron procesador en Excel a través del sistema de complementos real statistics, se aplicó la prueba de Shapiro Wilk que determino la distribución normal de los datos, la prueba F para varianzas de dos muestras la cual resulto en varianzas iguales por lo que se seleccionó la prueba paramétricas de T-student de muestras independientes para varianzas iguales. El resultado para análisis de una cola fue P valor de 0,04 por lo que podemos pensar que esa diferencia entre grupo control y experimental existe, y que en cuyo caso se dio mayor adherencia de Candida en el grupo control en comparación con el grupo experimental.

Conclusiones: la literatura es controvertida, podemos asumir que la mayor adherencia de Candida albicans en el grupo control fue por acción antimicrobiana del agente blanqueador sobre el grupo experimental.

 

Palabras clave: Peróxido de Hidrogeno; Blanqueamiento Dental Externo; Candida Albicans; Adherencia Candida.

 

 

 

INTRODUCCIÓN

El blanqueamiento dental es actualmente uno de los procedimiento estéticos más requeridos por los pacientes. La Academia Americana de Odontología Cosmética (American Academy of Cosmetic Dentistry) ha reportado que los procedimientos de blanqueamiento dental han incrementado en un poco más del 300 % entre el 2002 y el 2007 y que los números siguen creciendo alrededor de un 25 % anual.(2,3) El blanqueamiento dental fue descrito por primera vez en 1864 por Truman, quien usó, en dientes no vitales, varios compuestos tales como el hipoclorito de sodio, perborato de sodio y peróxido de hidrógeno.(2)

El blanqueamiento se define como un procedimiento clínico por medio del cual se pueden aclarar uno o varios dientes, con agentes químicos como peróxidos o cloruros en diversas concentraciones; por medio de este método se eliminan sustancias colorantes, también llamadas cromógenos.(1,2) Dentro de las modalidades de blanqueamiento existe la profesional aplicada en el consultorio y la domiciliaria con control profesional. Dentro de las sustancias aplicadas el peróxido de hidrógeno en sus diferentes concentraciones es uno de los más empleados10. El peróxido de hidrógeno (H202) es un agente oxidante altamente reactivo de presentación líquido claro, sin color ni olor, altamente soluble en agua, inestable y cáustico(9). Su peso molecular es bajo, lo que facilita su elevado poder de difusión a través de los tejidos. Al entrar en contacto con la saliva el peróxido de hidrógeno se disocia en oxígeno y radical hidroxilo (HO), siendo el oxígeno el responsable del efecto blanqueador, actuando como agente oxidante formando radicales libres, aniones de peróxido de hidrógeno y moléculas de oxígeno reactivo, los cuales son los encargados de romper los dobles enlaces de las cadenas presentes en los cromóferos para hacerlos partículas pequeñas, mediante un proceso de óxido – reducción.(2)

En fases posteriores de la oxidación por el blanqueamiento, se llega a un punto donde solo existe la estructura hidrofílica incolora o punto de saturación del material, en donde la característica principal es la no modificación del color de los dientes, se interrumpe el proceso y la cantidad de blanqueamiento logrado. Si se sobrepasa esta fase, se empiezan a degradar las cadenas de carbono de las proteínas de otros materiales que contengan carbón para posteriormente convertirse en dióxido de carbono y agua. Se produce una oxidación completa de la matriz del esmalte, lo torna poroso y frágil. Vargas-Koudriavtsev et al.(3) concluyen que el blanqueamiento dental con peróxido de hidrógeno al 14 % produjo una pérdida de fosfato dental continua a lo largo de las cuatro semanas de tratamiento y representó una pérdida mineral de aproximadamente 22 %. Baiping F. et al.(5), observaron que los blanqueamientos dentales causan alteraciones micro y nanomorfológicas en la superficie del esmalte, reducen significativamente el grosor del barro adamantino en esmalte desgastado, y además, postulan que la matriz orgánica del esmalte es fácilmente movilizada por el ataque de los radicales libres, causando micro cráteres. Tezel H. et al.(7) concluyeron que el uso de H2O2 al 35 % activado con luz y el H2O2 al 38 % aplicado en las superficies del esmalte por 15 minutos 3 veces al día, durante 3 días causa desmineralización por pérdida de iones de calcio6. Un estudio realizado por Hegedüs C.et al.(9) observaron con microscopía de fuerza atómica que dientes tratados con peróxido de hidrógeno al 35 %, presentan en la superficie del esmalte ranuras de mayor profundidad en comparación con especímenes control, por lo que concluyó que el peróxido de hidrógeno es capaz de penetrar en el esmalte, y su capacidad oxidativa tiene un mayor efecto en la subsuperficie del esmalte donde se encuentra una mayor concentración de material orgánico, produciendo alteraciones sobre ésta. Mancera C et al.(1) concluyen que el H2O2 al 38 % modifica la microestuctura del esmalte in-vitro, con una perdida minera del 50 % de calcio y 39 % de fosfato. El fosfato ejerce una acción cariostática, es decir, reduce la solubilidad del esmalte y actúa como un búfer en la neutralización de los valores de pH de la saliva, la placa bacteriana y los alimentos. También, interfiere con los procesos enzimáticos en la superficie del esmalte para aumentar la resistencia del huésped, disminuir la adhesión bacteriana e interferir en la síntesis de formación de polisacáridos extracelulares. La disminución estructural de la microdureza del diente puede ser atribuida a la degradación de la superficie como resultado del proceso oxidativo de los radicales libres. La microdureza está directamente relacionada con el contenido de minerales del esmalte, por tanto una pérdida del grupo de fosfato puede alterar esta propiedad en el esmalte. Se produce una alteración de la rugosidad de la superficie y grietas más profundas, así como aumento de la porosidad de la superficie. Según Zeczkowski et al.(7) en 2015 menciona, "las alteraciones del esmalte después de un blanqueamiento dental son proporcionales al tiempo de tratamiento y la concentración de peróxido de hidrógeno empleada". Este efecto no deseado puede beneficiar la adherencia de microorganismos.

También se estudió que el uso continuo de los peróxidos puede alterar la flora y favorecer el crecimiento de candida albicans e hipertrofia de las papilas.(9)

 

Objetivo

Determinar si el blanqueamiento dental con peróxido de hidrogeno al 35 % aumenta la adherencia de C. albicans a la superficie del esmalte.

 

MÉTODO

Diseño de estudio: Experimental, Longitudinal (el análisis se realizó en un periodo de 72 hs).

Población: Premolares extraídos sanos de pacientes entre 13 y 35 años, con un tiempo post-extracción menor a 6 meses con indicación de ortodoncia.

 

Criterios de inclusión

Premolar de individuo hombre o mujer entre 13 y 35 años.

Premolar sano extraído por indicación diagnóstica ortodóntica, con menos de 6 meses post extracción.

 

Criterios de exclusión

Premolar con dentina expuesta.

Premolar con pigmentaciones o manchas blancas.

Premolar con malformaciones en su estructura.

 

Muestra: la muestra consta de 20 premolares superiores o inferiores sanos extraídos por indicación de ortodoncia, de pacientes entre 13 a 35 años, con un tiempo de post-extracción de 6 meses. Los cuales fueron divididos en dos grupos: control (P1) y los expuestos (P2).

Ensayo Piloto: se realizó un ensayo piloto con 10 premolares (5 control- 5 experimental) para experimentar la forma de recolección y siembra de los dientes a la capsulas de Petri, la recolección debía hacerse únicamente de la cara vestibular de la pd tratadas, a diferencia de tomar la muestra de una disolución. Los pasos de estudio piloto fueron:

1.   Profilaxis de pd con brocha y agua.

2.   Blanqueamiento siguiendo las indicaciones del fabricante con Clarident-X, posterior lavado.

3.   Esterilización de ambos grupos, en autoclave 100º por una hora.

4.   Se preparó tubos de ensayo con 15 ml agua destilada estéril a la cual se inoculo Candida albicans con inoculo de grado 0,5 con respecto a la escala de McFarland. Se introdujo una pd por tubo. Tiempo de incubación de 48 hs.

5.   Posteriormente se retiraron los pd y se tomó de la cara vestibular con hisopos, para siembra en capsulas de Petri con agar sabouraud glucosado, cada hisopo fue descartado. Tiempo de incubación 48 hs.

6.   Recuento de colonias. Se observó múltiples colonias las cuales no pudieron ser cuantificadas.

 

Resumen Errores de Estudio Piloto

Ausencia de centrifugado: en la boca hay movimiento de labios, lengua, alimentos y cepillado el cual puede ser correcto o no. Al centrifugar podría desprenderse cepas, lo cual simularía en tentativa los movimientos fisiológicos de la cavidad oral.

Recolección de muestra: la toma fue tan excesiva que la misma no puedo cuantificarse.

Tiempo de incubación: en un lapso de 36 horas, ya se podían visualizar colonias.

 

Protocolo final para estudio preliminar

Obtención y conservación de la muestra: conforme lo detallado en los criterio de inclusión, las piezas dentarias luego de ser extraídas se lavan con agua y jabón neutro con cepillo de cerdas medias eliminando saliva y sangre sin afectar estructuras orgánicas e inorgánicas; ya que los jabones neutros, tienen PH similar a la saliva (7,2 a 7,4) que difícilmente afectan el diente16. Posteriormente se curetea su raíz con curetas de Gracey Hu Friedy nº 7-8 , para retirar restos orgánico del ligamento periodontal y sarro. Se practica profilaxis con brocha y agua en toda su superficie, se secan con papel absorbente y se almacenan en seco, en un recipiente hermético estéril bajo refrigeración 4 º para reducir el crecimiento bacteriano. El almacenamiento de los dientes es uno de los procesos más importantes para conservar sus propiedades físicas, químicas y mecánicas para no alterar los resultados de investigaciones. Al momento de iniciar el método experimental se rehidratan en solución fisiológica estéril debido a que cuando pasan mucho tiempo fuera de boca, se resecan y se vuelven quebradizos, pierden su textura y dureza.(17)

Profilaxis y Acondicionamiento: la formación de los grupos es al azar, el grupo control queda inmerso en agua destilada estéril dentro de recipientes estériles colocados dentro de una estufa a 37°C hasta su posterior evaluación. Mientras que al grupo experimental se le aplica el agente blanqueador de la siguiente forma:

1.   Lavaje con brocha, pasa profiláctica Dent-brill Pre Fluor marca Dickinson y agua.

2.   Exposición de peróxido de Hidrogeno al 37 % como indica el fabricante, tres aplicaciones en capas de espesor uniforme de 1 mm.

3.   Retiro de agente y lavado con agua destilada, secado con papel absorbente.

4.   Se colocan las pd en recipientes de vidrio de cierre hermético estériles con agua destilada estéril para ser esterilizados.

 

Ambos grupos serán esterilizados en autoclave a 100°C por un periodo de 60 minutos, ya que el uso de autoclave a 115 °C por 40 minutos, no es recomendado dado que en pruebas mecánicas, genera pérdida de minerales.(16) Por arriba de los 100 º el esmalte se ve afectado en su estructura. Dado que el esmalte presenta un alto contenido inorgánico representado en fosfato octacálcico en forma de cristales de hidroxiapatita de calcio y un escaso contenido orgánico y de agua que sufre combustión y evaporación respectivamente, el aumento de temperatura altera la organización de dichos cristales aumentando su cohesión (contracción térmica), lo que genera la aparición inicial de fisuras y grietas que le proporcionan un aspecto cuarteado y que finalmente ocasionan su fractura.(18)

 

Exposición de la cepa

Obtención de la cepa: del laboratorio se obtiene una capsula de Petri con la colonia de microorganismo, se aplicaran repiques para mejorar las condiciones de la cepa. Los repiques o trasplantes, consisten en colocar al microorganismo ya aislado o en vías de aislación en un nuevo medio de cultivo a fin de conservarlo a través del tiempo, lo que permitirá realizar diferentes estudios.

Preparación y estandarización del inóculo: Transcurrido el tiempo de incubación, con la ayuda de un asa bacteriológica se toma una muestra del cultivo inicial y se diluye dentro de un tubo de ensayo con 15 ml de solución fisiológica estéril, el cual luego se agita durante 30 segundos hasta obtener una turbidez semejante al tubo número 0,5 del Nefelómetro de Mc Farland, cuya concentración bacteriana es de 1,5 x 108 UFC/ml . Esta comparación se lleva a cabo visualmente utilizando un fondo blanco con líneas negras contrastantes y fuentes de luz adecuada. El inóculo preparado se utiliza inmediatamente después de su preparación.

Exposición: Se inocula 0,1 ml de la cepa diluida en dos frascos estériles con 15 ml de solución fisiológica estéril uno del grupo control y otro del grupo experimental. Luego, se incuban en una estufa a 37°C por 36 horas.

Siembra: Transcurrido este tiempo de incubación, se sacan las piezas dentarias de dichos frascos y se lavan con solución fisiológica estéril. Luego se toma cada pieza dentaria con una pinza de algodón y se extrae con un microbrush estéril de la cara vestibular en forma de zic-zac sobre la superficie del esmalte. Se corta la punta de microbrush colocándola en un tubo de solución fisiológica estéril, se centrifuga a 3000 rpm, se toma con micropipeta de 7 microlitros del sobrenadante y se siembra estriando con asa de anillo calibrada. Se plaquetea en placas Petri conteniendo Agar Sabouraud, estriando la muestra sobre toda la superficie del agar. Se dejan reposar por unos minutos para que la muestra se seque y luego se voltean de posición para ser incubadas en una estufa por 36 horas a 37 º.

 Recuento de Unidades Formadoras de Colonias (UFC): después del tiempo transcurrido, se procede a la evaluación de la adherencia de cada premolar por grupo mediante el recuento de Unidades Formadoras de Colonias de la placa Petri a través de la observación macroscópica y con la ayuda de una lupa. Se emplea la técnica de conteo manual para obtener el número de Unidades Formadoras de Colonias, para lo cual la placa Petri se dividió en cuatro cuadrantes, de los cuales se seleccionó un área de 1 cm representativo por cuadrante. La suma del número de colonias obtenido de cada área de los cuatro cuadrantes se dividió entre el número de cuadrantes, y el resultado se multiplica por el inverso de la dilución y por el volumen de siembra usado. Por medio de cálculos matemáticos se obtiene el número de Unidades Formadoras de Colonias por 1 ml (UFC/ml).

 

Tabla 1. Resumen del Protocolo

Obtención y almacenamiento

Luego de ser extraídas se lavan con agua y jabón neutro con cepillo de cerdas medias. Se almacenan en seco, en un recipiente hermético estéril bajo refrigeración 4 º.

Profilaxis, blanqueamiento y esterilización

Lavaje con brocha, pasa profiláctica Dent-brill Pre Fluor marca Dickinson y agua.

Exposición del grupo experimental de peróxido de Hidrogeno al 37 % como indica el fabricante, tres aplicaciones en capas de espesor uniforme de 1 mm. Esterilización en autclave 100 Cº.

Exposición a la cepa

Se toma una muestra del cultivo inicial y se diluye dentro de un tubo de ensayo con 15 ml de solución fisiológica estéril, el cual luego se agita durante 30 segundos hasta obtener una turbidez semejante al tubo número 0,5 del Nefelómetro de Mc Farland. Se inocula 0,1 ml de la cepa diluida en dos frascos estériles con con 15 ml de solución fisiológica estéril uno del grupo control y otro del grupo experimental. Luego, se incuban en una estufa a 37°C por 36 horas.

Siembra

 Con la punta de microbrush colocándola en un tubo de solución fisiológica estéril, se centrifuga a 3000 rpm, se toma con micropipeta de 7 microlitros del sobrenadante y se siembra estriando con asa de anillo calibrada.

Recuento de UFC

Técnica de conteo manual con lupa.

 

RESULTADOS

Los resultados fueron almacenados en Excel y procesados por medio de sistema de complementos real statistics de Excel. Se aplicó la prueba de Shapiro –Wilk para determinar si los datos corresponden a una distribución normal, el resultado fue positivo.

 

Tabla 2. Shapiro-Wilk Test

 

Grupo control ufc

0

Grupo experimental ufc

W-stat

0,950584596

#¡VALOR!

0,978663823

p-value

0,675420702

#¡VALOR!

0,957617503

Alpha

0,05

0,05

0,05

Normal

Yes

#¡VALOR!

yes

 

Como los datos corresponden a una distribución normal se aplicó una prueba de varianzas para determinar si las mismas eran iguales o no. Prueba de F se utiliza para comparar directamente las varianzas de dos muestras. Si el valor p de la prueba es mayor que el nivel de significancia (generalmente 0,05), no se rechaza la hipótesis nula de que las varianzas son iguales.

 

Tabla 3. Prueba F para varianzas de dos muestras

 

Grupo control ufc

Grupo experimental ufc

Media

70,2

58,5

Varianza

110,1777778

322,5

Observaciones

10

10

Grados de libertad

9

9

F

0,34163652

 

P(F<=f) una cola

0,062687547

 

Valor crítico para F (una cola)

0,314574906

 

 

Como se obtuvo que las varianzas son iguales, se procedió a aplicar la prueba de T- para muestras independientes de varianzas iguales.

 

Tabla 4. Prueba t para dos muestras suponiendo varianzas iguales

 

Grupo control ufc

Grupo experimental ufc

Media

70,2

58,5

Varianza

110,1777778

322,5

Observaciones

10

10

Varianza agrupada

216,3388889

 

Diferencia hipotética de las medias

0

 

Grados de libertad

18

 

Estadístico t

1,778703528

 

P(T<=t) una cola

0,046091281

 

Valor crítico de t (una cola)

1,734063607

 

P(T<=t) dos colas

0,092182562

 

Valor crítico de t (dos colas)

2,10092204

 

 

El resultado de la prueba de T- student, pone en evidencia que el p valor de 0,04 es significativamente estadístico, por lo que podemos pensar que esa diferencia entre grupo control y experimental existe, y que en cuyo caso se dio mayor adherencia de Candida albicans en el grupo control en comparación con el grupo experimental.

 

DISCUSIÓN

El blanqueamiento dental es un procedimiento estético con alta demanda que se ha investigado desde sus inicios. Los agentes oxidantes más utilizados en odontología, para lograr el efecto blanqueador, son peróxido de hidrógeno y peróxido de carbamida en distintas concentraciones y forma de presentación.(19) El uso de estos agentes oxidantes, ha demostrado utilidad para mejorar clínicamente las condiciones estéticas de piezas dentarias con pigmentaciones endógenas y exógenas, sin embargo, los fundamentos bioquímicos del blanqueamiento de estas pigmentaciones no se han dilucidado con precisión, así como tampoco el efecto de estas moléculas oxidantes sobre la organización estructural y molecular de las piezas dentarias. Estudios realizados sobre el efecto del peróxido de hidrógeno, respecto a los cambios morfológicos producidos sobre los tejidos dentarios son contradictorios, sin embargo por lo general concuerdan en que el peróxido de hidrógeno puede alterar el contenido mineral de la pieza dentaria. El uso de peróxido de hidrógeno para blanqueamiento, produce una liberación de iones de calcio y fosfato, los cuales aumentan a medida que aumenta la concentración del peróxido.

Los estudios que refieren su efecto en correlación a adhesión de microorganismos, datan desde su origen en 1989 por Haywood et al.(19). Los resultados obtenidos por Hosoya(20) y Anggakusuma(21), concluyen que la adhesión bacteriana aumenta tras el uso del peróxido de hidrógeno al 35 % y peróxido de carbamida al 35 %, respectivamente. Comparando el peróxido de hidrógeno al 35 % con sus otras concentraciones, los resultados son similares a los obtenidos por Al-Jubori(22) y Romero(23), quienes encontraron que el peróxido de hidrógeno al 7,5 % aumenta significativamente los índices de adherencia bacteriana. Suttinee(31) comprueban que formación de biopelículas de S. sanguis fue significativamente mayor en las muestras de esmalte blanqueadas con peróxido de hidrógeno al 35 % que en otros tratamientos, pero fue menor en las blanqueadas con peróxido de hidrógeno al 25 %.

Podemos atribuir estos resultados a la serie de alteraciones que se presentan en el esmalte sometido a agentes de blanqueamiento dental.(23,2,15,18) Estos pueden modificar sus características superficiales(9) dejándolo más susceptible a la adherencia bacteriana. Asimismo, al alterar químicamente los sitios de unión a la membrana de esta superficie incrementarían la adherencia bacteriana en el esmalte. Uno de los efectos desfavorables del blanqueamiento dental es la erosión del esmalte debido a su desmineralización, lo que causa una mayor rugosidad en la estructura dental.(24) La rugosidad superficial se considera como un factor predisponente para la adherencia bacteriana por su importante rol en el desarrollo del biofilm de las bacterias orales. Según la literatura una superficie rugosa puede actuar como amortiguador en contra de las fuerzas de corte e incrementar el área disponible para la formación de biofilm, promoviendo así la adherencia bacteriana.(25)

Este estudio tuvo como objetivo comprar la adhesión de C. albicans entre dos grupos. Los resultados de este estudio arrojaron que el grupo control tiene mayor adhesión de dicho microorganismo. Esta discrepancia se debería a la continua liberación de peróxido por parte de los productos blanqueadores, lo que ocasionaría un cambio en el balance biológico existente dentro la cavidad oral. Asimismo, se ha reportado que la liberación de oxígeno por parte del peróxido de hidrógeno tiene un efecto antibacteriano y una acción mecánica sobre la placa dental.(27) Esto fue similar para Zheng(26), que observó crecimiento de biofilm a partir de la tercera semana, antes de ello lo encontró disminuido. Por otro lado, Ittatirrut(27), no encontró un aumento en la formación de biofilm tras este método de blanqueamiento dental con peróxido de hidrógeno al 35 %. Michelle(35) en ensayo controlado doble ciego sobre la acción de tres agentes blanqueadores en la microbiota oral, concluyo que esta se mantuvo estable a los largo del tratamiento. Al igual Alkmin(36) evaluó los efectos in vivo de los agentes blanqueadores que contienen peróxido de carbamida al 10 % y peróxido de hidrógeno al 7,5 % sobre Streptococcus mutans durante el blanqueamiento dental, concluye que no hubo cambios en los recuentos del microorganismo. Esto podría explicarse por la acción de la lactoperoxidasa salival, una enzima oral, que cataliza la reacción entre el tiocianato y el peróxido de hidrógeno, produciendo hipotiocianato, que es mucho menos tóxico que el peróxido de hidrógeno para las bacterias, protegiendo a los estreptococos contra el peróxido de hidrógeno. Philippe(35) en el estudio in vitro comparativo de la acción de la lactoperoxidasa en la formación de productos finales para prevenir la formación de biopelículas de Candida, concluye que en presencia de peróxido de hidrogeno esta enzima con sus productos finales son activas contra la formación de biopelículas. Tabata V.(29) reportaron que la aplicación de peróxido de hidrogeno puede alterar la organización de la matriz extracelular, además de la desarticulación de la matriz con células fúngicas dispersas posterior aplicación de peróxido de hidrogeno en biopelículas de C. albicans en comparación con su grupo control. Otros estudiaron su uso como antimicrobiano en prótesis removibles(38,40,41) como desinfectante(39) cuya concentración del agente era directamente proporcional a su efecto citotóxico sobre Candida, que puede ser en combinación con otro químicos o su empleo adyuvante a la terapia fotodinámica para el tratamiento antimicrobiano periodontal.(41,43) Ferguson(44) determino en un estudio in-vitro que la concentración inhibitoria mínima (CIM) de peróxido de hidrogeno para Candida fue de <0,63 μg/ml. Mc Donell(37) concluye que H2O2 en forma acuosa con agua como vehículo se emplea como buen conservante, como antimicrobiano en la piel, incluidas las heridas, y en superficies inanimadas. Se han realizado avances tecnológicos recientes en la formulación de peróxido con otros productos químicos para mejorar la actividad antimicrobiana a concentraciones más bajas del agente activo para desinfección y esterilización. Nipomoga(32) concuerda con la mayor sensibilidad de C. Albicans a la acción antimicrobiana de los agentes blanqueadores. Por lo contrario Oliveira(44) en otro estudio sobre la actividad antimicrobiana de 4 agentes blanqueadores sobre 6 patógenos orales, C. albicans resulto ser uno de los más resistentes. La literatura relacionada con el efecto antimicrobiano del H2O2 es controvertida. Para explicar por qué el grupo control (sin blanqueamiento) tuvo más adhesión de Candida que el grupo experimental (con H2O2) hace falta más estudios.

Para estudios futuros podemos sugerir aumentar el tamaño de la muestra. El resultado de este estudio está limitado por el uso de dientes humanos extraídos, lo cual inherentemente diferirá de los dientes vitales en el ambiente oral. Para este ensayo se tomó como muestras premolares sanos extraídos por indicación ortodoncia de pacientes entre 15 y 35 años. Otros estudio emplearon terceros molares(20,24,26) otros diente bovinos.(21,27) Los protocolos de obtención y almacenamiento fueron muy variados en la literatura. Por la falta de estudios previos elaboramos un protocolo para determinar cómo obtener y almacenar las muestras de dientes, ya que carecemos de un biobanco para estudios en la Argentina. El protocolo de obtención y almacenamiento se redactó a partir de la búsqueda bibliográfica, pero no podemos determinar que ejecutamos el más correcto, asumiendo que puede atribuirse un error de sesgo a esta instancia del estudio. A partir del protocolo inicial desarrollamos un ensayo piloto. Pasando en limpio los datos obtenidos ajustamos el protocolo para el estudio final. Asimismo, no se contó con estudios actualizados sobre el efecto del blanqueamiento aplicado profesionalmente con peróxido de hidrógeno al 35 % en la adherencia de C. albicans a la superficie dental. La valoración por medio el recuento de UFC, es un método semi cuantitativo que se emplea regularmente para determinar el número de microorganismos viables que hay en una muestra. Hosoya(20) emplea la microscopia electrónica de barrido para cuantificar el número de colonias de S. mutans, este método ofrece ventajas. En cuanto a la elección de la cara vestibular de la piezas dentarias seleccionas se decidió a partir de que Brosh et al.(30) descubrieron en su examen con microscopio electrónico de barrido (SEM) de dientes no tratados mostró que las crestas horizontales pronunciadas o periquimas recorren continuamente la superficie bucal del diente, mientras que en la superficie lingual aparecían en menor grado o no en absoluto. Además, su examen con SEM después del procedimiento de grabado ácido mostró que la superficie lingual tenía un patrón macro más liso, microporos más pequeños y una apariencia ondulada menos pronunciada después del acondicionamiento, por lo que se pudo desarrollar un menor entrelazamiento mecánico entre la resina y el esmalte. Los autores plantearon la hipótesis de que la apariencia más lisa de la superficie lingual estaba influenciada por el contacto continuo de la lengua o la presencia de glándulas salivales. Por lo tanto, la estimación del blanqueamiento dental y adherencia de C. albicans debía tomarse solo la cara vestibular. Sumado a lo anterior en la práctica profesional se aplica el agente en la cara vestibular de las piezas por lo que solo consideramos de interés la cara vestibular de las piezas dentarias seleccionadas tanto del grupo control como experimental.

 

CONCLUSIONES

Según los resultados obtenidos, podemos concluir que hubo mayor adherencia de C. alicans en el grupo control, ya que, al compararlo con el grupo experimental, hubo una diferencia estadísticamente significativa respecto a la adherencia de C. albicans (p=0,04 T.Student). Este hallazgo podría explicarse por acción antimicrobiana del agente blanqueador.

Cabe destacar la originalidad del procedimiento empleado en el ensayo, ya que el protocolo utilizado en el este estudio no fue puesto a prueba por ningún otro investigador, su optimización se basó en literatura y otros ensayos cuyos objetivos eran similares al de este estudio.

Sugerimos para estudios posteriores aumentar el tamaño de la muestra para la comparación de grupos con diferentes concentraciones del agente blanqueador como así también disponer de Microscopio Electrónico de Barrido (1000X y 1500X) para el análisis de superficie post blanqueamiento, lo que sería de mucho interés.

Este trabajo fue un ensayo preliminar, podemos concluir que hace falta más estudios que comparen adherencia de C. albicans posterior al blanqueamiento profesional utilizando peróxido de hidrogeno al 35 % en esmalte dental.

 

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FINANCIACIÓN

Ninguna.

 

CONFLICTO DE INTERÉS

Los autores declaran que no existe conflicto de intereses.

 

CONTRIBUCIÓN DE AUTORÍA

Conceptualización: Marina Laura Kees, María Isabel Brusca, María Laura Garzon, Atilio Vela Ferreira, Virginia Jewtuchowicz.

Curación de datos: Marina Laura Kees, María Isabel Brusca, María Laura Garzon, Atilio Vela Ferreira, Virginia Jewtuchowicz.

Análisis formal: Marina Laura Kees, María Isabel Brusca, María Laura Garzon, Atilio Vela Ferreira, Virginia Jewtuchowicz.

Redacción – borrador original: Marina Laura Kees, María Isabel Brusca, María Laura Garzon, Atilio Vela Ferreira, Virginia Jewtuchowicz.

Redacción – revisión y edición: Marina Laura Kees, María Isabel Brusca, María Laura Garzon, Atilio Vela Ferreira, Virginia Jewtuchowicz.